明日叶的组织培养与快速繁殖

研究地点:南京大学生命科学学院、浙江林学院浙江省现代森林培育技术重点实验室

1植物名称:明日叶(AngelicakeiskeiKoidz.)。

2材料类别:叶,叶柄,带芽茎段。

3培养条件:以MS为基本培养基。

(1)芽诱导培养基:MS+6-BA2mg•L-1(单位下同)+NAA0.5;

(2)芽增殖培养基:MS+6-BA1;(3)生根培养基:MS+NAA1。以上培养基均含3%蔗糖、1%琼脂,pH6.8。培养温度(22±2)℃,光强40µmol•m-2•s-1左右,光照时间16h•d-1。

4生长与分化情况

4.1取材与消毒取明日叶长约1cm的带芽茎段、叶片和叶柄,用洗衣粉漂洗5min,流水冲洗10min,然后在超净工作台上用70%酒精浸泡10s,再用0.1%HgCl2灭菌10min,并不断搅拌,最后用无菌水冲洗5~8次,消毒也可省去酒精浸泡的步骤。用无菌滤纸吸干材料上的水分,切割叶片为0.5cm×0.5cm的小片,叶柄长0.5cm,将3种材料接种在培养基(1)上。

4.2愈伤组织及不定芽的诱导明日叶叶片和叶柄在培养基(1)上,经过3个多月的培养,未长出愈伤组织。最适合的外植体为带芽茎段,在培养基(1)上,30d左右便形成白色愈伤组织,并长出绿色芽点。继续培养后可诱导出丛生状芽。

4.3增殖培养将丛生芽分离,再接到培养基(2)中,20d左右芽增殖,增殖倍数约为3。通过反复切割,在较短时间里可得到大量丛生芽。

明日叶的继代增殖

图1 明日叶的继代增殖

4.4生根与移栽将丛生芽切割后接到生根培养基(3)中,约40d后,开始出现根。在生根培养过程中发现,全天24h暗培养有利于生根,暗培养约20d即可生根。长出根后继续培养20d,根可达1~1.5cm,生根率约80%,苗高4~5cm。此时,将培养瓶放到全天自然光,温度约25℃的通风房间里炼苗20d,然后打开瓶盖,用镊子将试管苗从培养瓶中取出,洗掉根部培养基,移栽入营养土中,早晚各喷水1次,10d后,移栽苗成活率80%以上。

5意义与进展

明日叶,又名八丈芹、灵草、海峰人参、长寿菜,属伞形科当归属2年生或多年生草本植物,是一种药食兼用的蔬菜。本文中的明日叶原产于日本火山灰地质的八丈岛,适应高冷环境,在中、高海拔可全年栽种,低海拔或平原地区适秋种。20多年前从日本引进,我国台湾亦广泛栽培。

据日本食品分析中心研究,此种植物含有高浓度的天然有机锗和一般植物性食物很少有的维生素B12,以及丰富的叶绿素,同时还含有人体所需要的20多种矿质元素和特殊物质。具有增强免疫力、补血、抗菌、促进成长、增进食欲和防癌等功效。

明日叶的果实是双悬果,其种子发芽率较低,不易栽培。组织培养技术可以大大提高其繁殖系数,有一定的潜在性应用前景。

 

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